SAMENVATTING EN UITLEG DE TEST
Viscerale leishmaniasis, of Kala-azar, is een verspreide infectie die wordt veroorzaakt door verschillende ondersoorten van de L. donovani.Volgens schattingen van de Wereldgezondheidsorganisatie (WHO) treft de ziekte ongeveer 12 miljoen mensen in 88 landen.Het wordt op mensen overgedragen door beten van de Phlebotomus-zandvliegen, die besmet raken door zich te voeden met geïnfecteerde dieren.Hoewel het een ziekte is die voorkomt in arme landen, is het in Zuid-Europa de belangrijkste opportunistische infectie bij aids-patiënten geworden.Identificatie van het L. donovani-organisme uit het bloed, het beenmerg, de lever, de lymfeklieren of de milt biedt een duidelijk middel voor de diagnose.Serologische detectie van anti-L.donovani IgM blijkt een uitstekende marker te zijn voor de acute viscerale leishmaniasis.Tests die in de kliniek worden gebruikt, zijn onder meer ELISA-, fluorescerende antilichaam- of directe agglutinatietests 4-5.Onlangs heeft het gebruik van L. donovani-specifiek eiwit in de test de gevoeligheid en specificiteit drastisch verbeterd.
De Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test is een op recombinant eiwit gebaseerde serologische test, die tegelijkertijd IgG- en IgM-antilichamen tegen L. Donovani detecteert.Zonder instrumenten geeft de test binnen 15 minuten een betrouwbaar resultaat.
BEGINSEL
De Leishmania IgG/IgM Rapid Test is een immunoassay met laterale flowchromatografie.De testcassette bestaat uit: 1) een bordeauxrood conjugaatkussen met recombinant L. donovani-antigeen geconjugeerd met colloïdgoud (Leishmania-conjugaten) en IgG-goudconjugaten van konijnen, 2) een nitrocellulosemembraanstrip met twee testbanden (T1- en T2-banden) en een controleband (C-band).De T1-band is voorgecoat met monoklonaal anti-humaan IgM voor de detectie van anti-L.donovani IgM, T2-band is voorgecoat met reagentia voor de detectie van anti-L.donovani IgG, en de C-band is vooraf bekleed met geiten-anti-konijnen-IgG.
Wanneer een voldoende hoeveelheid testmonster in de monsterholte van de cassette wordt gedoseerd, migreert het monster door capillaire werking door de cassette.De L. donovani IgM, indien aanwezig in het monster, zal zich binden aan de Leishmania-conjugaten.Het immunocomplex wordt vervolgens op het membraan gevangen door het voorgecoate anti-menselijke IgM-antilichaam, waardoor een bordeauxrode T1-band wordt gevormd, wat wijst op een L. donovani IgM-positief testresultaat.De L. donovani IgG, indien aanwezig in het monster, zal zich binden aan de Leishmania-conjugaten.Het immunocomplex wordt vervolgens opgevangen door de voorgecoate reagentia op het membraan, waardoor een bordeauxrode T2-band wordt gevormd, wat wijst op een L. donovani IgG-positief testresultaat.
Afwezigheid van T-banden (T1 en T2) duidt op een negatief resultaat.De test bevat een interne controle (C-band) die een bordeauxrode band van het immunocomplex van geit-antikonijn-IgG/konijn-IgG-goudconjugaat moet vertonen, ongeacht de kleurontwikkeling op een van de T-banden.Anders is het testresultaat ongeldig en moet het monster opnieuw worden getest met een ander apparaat.
